专业科普美洲大蠊对肺癌的影响,好医生美蠊
美洲大蠊提取物对两株人肺癌细胞的影响
2.2流式细胞术测受试物对细胞凋亡、坏死的影响取对数生长期的NCI-H、NCI-H细胞,调整细胞密度为2xmL-1,以5mL·瓶-1接种于25cm2细胞培养瓶中。
设空白对照组﹑受试物3个剂量组,细胞经样品处理48h后(对NCI-H细胞,CⅡ-3浓度分别为25,50,75μg·mL-1;对NCI-H细胞,CⅡ-3浓度分别为20,40,80μg·mL-1),用0.2mL预冷PBS液洗涤1次(r·min-1,5min),然后用μL预冷的PBS重悬细胞,分别逐滴加入μL预冷的无水乙醇,充分吹打以固定细胞,放入4℃冰箱保存备用。
取出4℃冰箱保存的各待测样本,离心收集细胞(r·min-1,5min)弃固定液,加入R-Nase酶室温下处理10min,然后加入1mL的碘化丙啶(PI)染液于室温下避光染色30min,上机分析。3结果处理计算CⅡ-3不同测试浓度吸光度的均数及标准差,并用(对照组吸光度–给药组吸光度)/对照组吸光度x%计算细胞的抑制率。
细胞的IC50值由GWBASIC软件计算得到,应用SPSS11.5统计软件对数据进行处理,多组数据比较采用方差分析。3.1CⅡ-3对2株人肺癌细胞作用48h的IC50由表1可看出CⅡ-3对NCI-H和NCI-H细胞的IC50值均较小,均小于50μg·mL-1。
3.2CⅡ-3作用48h后对2株细胞凋亡、坏死率及细胞周期的影响3.2.1CⅡ-3作用48h后对NCI-H细胞凋亡、坏死率及细胞周期的影响由表2可见,CⅡ-33个剂量组细胞凋亡、坏死率与对照组比较,都显著增大(P0.01),且随剂量增加而增大,具有一定的剂量依赖性(r=0.)。
从细胞周期来看,25μg·mL-1CⅡ-3组,细胞G0/G1、S期含量下降,G2/M期含量显著增加,细胞可能被阻止于G2/M;50μg·mL-1CⅡ-3组,细胞G0/G1、S期含量增加,G2/M期含量下降,细胞可能被阻滞于S期。
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